Глобальні стандарти аналізу сперми людини: Порівняльний посібник (ВООЗ 6-те видання, ISO 23162, ESHRE, & ASRM)
У 2021 році ландшафт андрології людини був перевизначений подвійним випуском Посібника ВООЗ 6-го видання та стандарту ISO 23162:2021. Ці документи перемістили галузь у напрямку суворої стандартизації, підкреслюючи, що точність можлива лише через суворий контроль якості та зменшення людської суб'єктивності.
1. Преданалітична фаза: основа якості
Стандартизація починається до того, як зразок потрапить під мікроскоп. Як ВООЗ 6-те видання, так і ISO 23162 підкреслюють, що преданалітичні змінні є найпоширенішою причиною "хибних" результатів субфертильності.
- Період утримання: Стандартизовано від 2 до 7 днів. ASRM зазначає, що хоча триваліше утримання збільшує об'єм та кількість, воно значно знижує рухливість та збільшує фрагментацію ДНК (DFI).
- Збір: Повинен виконуватися в контейнер, попередньо перевірений для аналізу виживання сперматозоїдів людини (HSSA).
- Макроскопічна оцінка: Об'єм повинен вимірюватися з високою точністю. ISO 23162 рекомендує вимірювання за вагою (припускаючи щільність 1,0 г/мл), щоб уникнути втрат "прилипання до стінки", пов'язаних з піпетками або градуйованими циліндрами.
- pH: Нижня межа залишається 7,2. Значення нижче цього, у поєднанні з низьким об'ємом, можуть вказувати на обструктивні проблеми (наприклад, CBAVD).
2. Концентрація та загальна кількість сперматозоїдів: кількісний показник
Кількісна оцінка виробництва сперматозоїдів є основним предиктором потенціалу фертильності.
А. Концентрація проти загальної кількості сперматозоїдів
- Концентрація сперматозоїдів: Кількість сперматозоїдів на мілілітр. Нижня межа ВООЗ 6-го видання: 16 × 10⁶/мл.
- Загальна кількість сперматозоїдів: Загальна кількість на весь еякулят (нижня межа ВООЗ 6-го видання: 39 × 10⁶).
- Клінічне значення: ASRM та ESHRE підкреслюють, що загальна кількість сперматозоїдів є більш надійним показником здоров'я яєчок, ніж одна концентрація, оскільки враховує весь репродуктивний вихід.
Б. Обладнання "золотого стандарту" (ISO 23162 проти інших)
- Покращена камера Нойбауера для підрахунку клітин: Як ВООЗ 6-те видання, так і ISO 23162 вимагають цього як єдино прийнятної ручної лічильної камери.
- Відхилення камер з фіксованою глибиною: Важливий момент розбіжності. ISO 23162 суворо забороняє використання камер з фіксованою глибиною (наприклад, предметних стекол Makler або Leja) для остаточної оцінки концентрації, оскільки їх високий коефіцієнт варіації (CV) не відповідає міжнародним стандартам точності.
- Повторний підрахунок: ISO 23162 вимагає двох окремих повторень (підрахунок принаймні 200 сперматозоїдів кожен). Якщо результати двох підрахунків не збігаються в певному статистичному діапазоні (розподіл Пуассона), тест повинен бути повторений.
3. Рухливість сперматозоїдів: вимірювання прогресивної компетентності
Рухливість є мірою "життєвої енергії". ВООЗ 6-те видання спростило класифікацію для зниження високої мінливості між спостерігачами, виявленої в попередніх виданнях.
А. Трикатегорійна класифікація
Попередня 4-бальна система (A, B, C, D) була замінена більш об'єктивною 3-категорійною системою:
- Прогресивна рухливість (PR): Сперматозоїди, що рухаються активно, або лінійно, або по великому колу, незалежно від швидкості.
- Непрогресивна рухливість (NP): Рух без прогресії (наприклад, плавання по маленьких колах або лише вібрація голівки/хвоста).
- Нерухливість (IM): Повна відсутність руху.
- Референсне значення: ВООЗ 6-те видання вимагає ≥30% прогресивної (PR) або ≥42% загальної рухливості (PR + NP).
Б. Термічна вимога ("реалістичне" середовище)
- Вимога ISO 23162: Рухливість сперматозоїдів сильно залежить від температури. ISO 23162 вимагає проведення аналізу при температурі 37°C.
- Клінічне обґрунтування: Аналіз при кімнатній температурі (20-22°C) викликає сповільнення метаболізму сперматозоїдів, що призводить до "хибно" низьких показників прогресивної рухливості. Інтегровані термостадії (як ті, що знаходяться в SQA-6100VET) необхідні для відповідності цьому стандарту.
4. Морфологія сперматозоїдів: "суворі критерії"
Морфологія забезпечує найглибше розуміння біологічного "контролю якості" яєчок.
А. Суворі критерії Крюгера (правило 4%)
Всі стандарти сходяться на критеріях Крюгера (Суворих). Сперматозоїд вважається "нормальним" лише якщо він по суті ідеальний. Будь-який "пограничний" сперматозоїд класифікується як аномальний.
- Поріг норми: ≥4%.
- Анатомія голівки/хвоста: Потрібні конкретні розміри для довжини голівки (3,7–4,7 мкм) та розміру акросоми (40–70% площі голівки).
Б. Індекс тератозооспермії (TZI)
ВООЗ 6-те видання рекомендує розраховувати TZI, який представляє середню кількість дефектів на аномальний сперматозоїд. Високий TZI є маркером значної дисфункції сперматогенезу, навіть якщо загальний відсоток нормальних перевищує 4%.
В. Клінічне застосування (ЕКЗ проти ІКСІ)
ASRM та ESHRE роз'яснюють, що найбільша клінічна корисність морфології полягає у виборі способу запліднення. Якщо морфологія <4%, лабораторії часто переходять від стандартного ЕКЗ до ІКСІ (інтрацитоплазматична ін'єкція сперматозоїда), щоб забезпечити ручний відбір найбільш привабливих сперматозоїдів для запліднення.
5. Зведена таблиця: порівняння стандартів ВООЗ 5-го та 6-го видань
Ця таблиця описує ключові "нижні референсні межі" (5-й процентиль) для сперми людини.
| Параметр | ВООЗ 5-те вид. (2010) | ВООЗ 6-те вид. (2021) |
|---|---|---|
| Об'єм сперми (мл) | 1,5 | 1,4 |
| Загальна кількість сперматозоїдів (10⁶/еякулят) | 39 | 39 |
| Концентрація сперматозоїдів (10⁶/мл) | 15 | 16 |
| Загальна рухливість (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Прогресивна рухливість (PR, %) | 32 | 30 |
| Життєздатність (живі сперматозоїди, %) | 58 | 54 |
| Нормальна морфологія (%) | 4 | 4 |
6. Гарантія якості лабораторії (центральний фокус ISO 23162)
Відповідність ISO 23162 вимагає більше, ніж просто слідування посібнику ВООЗ; потрібне документоване доказ точності.
- Внутрішньоспостерігацький CV: Техніки повинні довести, що можуть підрахувати один і той же зразок двічі та отримати той самий результат в межах 10% похибки.
- Зовнішня оцінка якості (EQA): Лабораторії повинні брати участь у глобальному тестуванні кваліфікації (як програми ESHRE або CAP), щоб порівнювати свої результати з іншими стандартизованими лабораторіями.
- Стандартизована звітність: Звіти повинні чітко вказувати, які стандарти дотримувалися, та включати референсні діапазони для кожного параметра, щоб допомогти клініцистам в інтерпретації.
Висновок: Шлях до точності
Модернізація аналізу сперми людини визначається переходом від "інтуїції техніка" до об'єктивних, автоматизованих та контрольованих за температурою методологій. Дотримуючись комбінованих вимог ВООЗ 6-го видання та ISO 23162, лабораторії забезпечують найвищий рівень діагностичної точності, надаючи пацієнтам надійну дорожню карту для їхньої подорожі до фертильності.
Посилання та технічні ресурси
- Всесвітня організація охорони здоров'я (2021). Посібник ВООЗ з лабораторного дослідження та обробки сперми людини, 6-те вид.
- ISO 23162:2021. Базове дослідження сперми — Специфікація та методи випробувань.
- Група спеціальних інтересів ESHRE з андрології. Найкращі практики аналізу сперми.
- Комітет з практики Американського товариства репродуктивної медицини (ASRM) (2021). Діагностична оцінка безплідного чоловіка: думка комітету.