İnsan Semen Analizi için Küresel Standartlar: Karşılaştırmalı Rehber (WHO 6. Baskı, ISO 23162, ESHRE ve ASRM)
2021 yılında, insan androlojisi alanı WHO 6. Baskı El Kitabı ve ISO 23162:2021 standardının çift yayını ile yeniden tanımlandı. Bu belgeler, alanı sıkı bir standardizasyona doğru taşıdı ve doğruluğun yalnızca katı kalite kontrolü ve insan öznelliğinin azaltılması ile mümkün olduğunu vurguladı.
1. Analiz Öncesi Faz: Kalitenin Temeli
Standardizasyon, numune mikroskoba ulaşmadan önce başlar. Hem WHO 6. hem de ISO 23162, analiz öncesi değişkenlerin "yanlış" düşük doğurganlık sonuçlarının en yaygın nedeni olduğunu vurgular.
- Abstinans Dönemi: 2 ila 7 gün arasında standardize edilmiştir. ASRM, daha uzun abstinansın hacim ve sayıyı artırsa da, motiliteyi önemli ölçüde azalttığını ve DNA fragmantasyonunu (DFI) artırdığını belirtir.
- Toplama: İnsan Sperm Hayatta Kalma Analizi (HSSA) için önceden doğrulanmış bir konteynere yapılmalıdır.
- Makroskopik Değerlendirme: Hacim yüksek hassasiyetle ölçülmelidir. ISO 23162, pipet veya dereceli silindirlerle ilişkili "duvara yapışma" kaybından kaçınmak için ağırlığa göre ölçümü önerir (yoğunluk 1.0 g/mL varsayılarak).
- pH: Alt sınır 7.2 olarak kalır. Bunun altındaki değerler, düşük hacimle birlikte, tıkanıklık sorunlarını (örneğin, CBAVD) gösterebilir.
2. Sperm Konsantrasyonu ve Toplam Sayı: Kantitatif Metrik
Sperm üretiminin kantitatif değerlendirmesi, doğurganlık potansiyelinin birincil öngörücüsüdür.
A. Konsantrasyon vs. Toplam Sperm Sayısı
- Sperm Konsantrasyonu: Mililitre başına sperm sayısı. WHO 6. alt sınır: 16 × 10⁶/mL.
- Toplam Sperm Sayısı: Tüm ejakulat başına toplam sayı (WHO 6. alt sınır: 39 × 10⁶).
- Klinik Değer: ASRM ve ESHRE, Toplam Sperm Sayısının, tüm üreme çıktısını hesaba kattığı için, yalnızca konsantrasyondan daha sağlam bir testiküler sağlık göstergesi olduğunu vurgular.
B. "Altın Standart" Ekipman (ISO 23162 vs. Diğerleri)
- Geliştirilmiş Neubauer Hemositometre: Hem WHO 6. hem de ISO 23162 bunu kabul edilebilir tek manuel sayma odası olarak zorunlu kılar.
- Sabit Derinlikli Odaların Reddi: Önemli bir ayrışma noktası. ISO 23162, yüksek Değişim Katsayılarının (CV) uluslararası hassasiyet standartlarını karşılamadığı için, kesin konsantrasyon değerlendirmesi için sabit derinlikli odaların (örneğin, Makler veya Leja slaytları) kullanılmasını kesinlikle yasaklar.
- Tekrarlı Sayım: ISO 23162, iki ayrı tekrar gerektirir (her biri en az 200 sperm sayımı). İki sayımın sonuçları belirli bir istatistiksel aralık (Poisson dağılımı) içinde uyuşmuyorsa, test tekrarlanmalıdır.
3. Sperm Motilitesi: İlerleyici Yetkinliğin Ölçümü
Motilite "yaşamsal enerji"nin ölçüsüdür. WHO 6., önceki baskılarda bulunan yüksek gözlemciler arası değişkenliği azaltmak için sınıflandırmayı basitleştirdi.
A. Üç Kategorili Sınıflandırma
Önceki 4 dereceli sistem (A, B, C, D) daha objektif bir 3 kategorili sistemle değiştirildi:
- İlerleyici Motilite (PR): Aktif olarak hareket eden spermler, hızlarına bakılmaksızın doğrusal veya büyük bir daire içinde.
- İlerleyici Olmayan Motilite (NP): İlerleme olmayan hareket (örneğin, küçük daireler içinde yüzme veya yalnızca baş/kuyruk titreşimi).
- Hareketsizlik (IM): Hiç hareket yok.
- Referans Değeri: WHO 6., ≥%30 İlerleyici (PR) veya ≥%42 Toplam Motilite (PR + NP) gerektirir.
B. Termal Gereksinim ("Yaşam Benzeri" Ortam)
- ISO 23162 Zorunluluğu: Sperm motilitesi sıcaklığa yüksek derecede bağımlıdır. ISO 23162, analizin 37°C'de yapılmasını gerektirir.
- Klinik Gerekçe: Oda sıcaklığında (20-22°C) analiz yapmak, sperm metabolizmasının yavaşlamasına neden olur, bu da "yanlış" düşük ilerleyici motilite skorlarına yol açar. Entegre ısıtma aşamaları (SQA-6100VET'te bulunanlar gibi) bu standarda uyum için gereklidir.
4. Sperm Morfolojisi: "Katı Kriterler"
Morfoloji, testislerin biyolojik "kalite kontrolü" hakkında en derin içgörüyü sağlar.
A. Kruger Katı Kriterleri (%4 Kuralı)
Tüm standartlar Kruger (Katı) Kriterlerinde birleşir. Bir sperm yalnızca esas olarak mükemmel ise "Normal"dir. Herhangi bir "sınırda" sperm anormal olarak kategorize edilir.
- Normal Eşik: ≥%4.
- Baş/Kuyruk Anatomisi: Baş uzunluğu (3.7–4.7 μm) ve akrozom boyutu (baş alanının %40–70'i) için belirli boyutlar gereklidir.
B. Teratozoospermia İndeksi (TZI)
WHO 6., TZI'nin hesaplanmasını önerir; bu, anormal sperm başına ortalama defekt sayısıdır. Yüksek bir TZI, toplam normal yüzde %4'ün üzerinde olsa bile, önemli spermatogenez disfonksiyonunun bir işaretidir.
C. Klinik Uygulama (IVF vs. ICSI)
ASRM ve ESHRE, morfolojinin en büyük klinik faydasının döllenme modunu seçmede olduğunu açıklar. Morfoloji <%4 ise, laboratuvarlar genellikle standart IVF'den ICSI'ye (Intrasitoplazmik Sperm Enjeksiyonu) geçerek, en iyi görünümlü spermlerin manuel olarak seçilmesini sağlar.
5. Özet Tablo: WHO 5. ve WHO 6. Standartlarının Karşılaştırılması
Bu tablo, insan semen için temel "Alt Referans Limitlerini" (5. persentil) özetler.
| Parametre | WHO 5. Baskı (2010) | WHO 6. Baskı (2021) |
|---|---|---|
| Semen Hacmi (mL) | 1.5 | 1.4 |
| Toplam Sperm Sayısı (10⁶/ejakulat) | 39 | 39 |
| Sperm Konsantrasyonu (10⁶/mL) | 15 | 16 |
| Toplam Motilite (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| İlerleyici Motilite (PR, %) | 32 | 30 |
| Canlılık (Canlı Sperm, %) | 58 | 54 |
| Normal Morfoloji (%) | 4 | 4 |
6. Laboratuvar Kalite Güvencesi (ISO 23162 Odak Noktası)
ISO 23162'ye uyum, yalnızca WHO el kitabını takip etmekten daha fazlasını gerektirir; dokümante edilmiş hassasiyet kanıtı gerektirir.
- Gözlemci İçi CV: Teknisyenler aynı numuneyi iki kez sayabilmeli ve %10 hata marjı içinde aynı sonucu alabilmelidir.
- Harici Kalite Değerlendirmesi (EQA): Laboratuvarlar, sonuçlarını diğer standardize laboratuvarlarla karşılaştırmak için küresel yeterlilik testlerine (ESHRE veya CAP programları gibi) katılmalıdır.
- Standardize Raporlama: Raporlar, hangi standartların takip edildiğini açıkça belirtmeli ve klinisyen yorumlamasına yardımcı olmak için her parametre için referans aralıklarını içermelidir.
Sonuç: Hassasiyete Giden Yol
İnsan semen analizinin modernizasyonu, "teknisyen sezgisi"nden objektif, otomatik ve sıcaklık kontrollü metodolojilere geçişle tanımlanır. WHO 6. ve ISO 23162'nin birleşik gereksinimlerine uyarak, laboratuvarlar en yüksek düzeyde tanı doğruluğunu sağlar ve hastalara doğurganlık yolculukları için güvenilir bir yol haritası sunar.
Referanslar ve Teknik Kaynaklar
- World Health Organization (2021). WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen, 6th ed.
- ISO 23162:2021. Basic semen examination — Specification and test methods.
- ESHRE Special Interest Group in Andrology. Semen analysis best practice guidelines.
- Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine (ASRM) (2021). Diagnostic evaluation of the infertile male: a committee opinion.