Глобальные стандарты анализа спермы человека: Сравнительное руководство (ВОЗ 6-е издание, ISO 23162, ESHRE, & ASRM)
В 2021 году ландшафт андрологии человека был переопределен одновременным выпуском Руководства ВОЗ 6-го издания и стандарта ISO 23162:2021. Эти документы продвинули область в сторону строгой стандартизации, подчеркивая, что точность возможна только благодаря строгому контролю качества и снижению человеческой субъективности.
1. Преданалитическая фаза: основа качества
Стандартизация начинается до того, как образец попадет под микроскоп. Как ВОЗ 6-е издание, так и ISO 23162 подчеркивают, что преданалитические переменные являются наиболее распространенной причиной "ложных" результатов субфертильности.
- Период воздержания: Стандартизирован от 2 до 7 дней. ASRM отмечает, что хотя более длительное воздержание увеличивает объем и количество, оно значительно снижает подвижность и увеличивает фрагментацию ДНК (DFI).
- Сбор: Должен выполняться в контейнер, предварительно проверенный для анализа выживаемости сперматозоидов человека (HSSA).
- Макроскопическая оценка: Объем должен измеряться с высокой точностью. ISO 23162 рекомендует измерение по весу (предполагая плотность 1,0 г/мл), чтобы избежать потерь "прилипания к стенке", связанных с пипетками или градуированными цилиндрами.
- pH: Нижний предел остается 7,2. Значения ниже этого, в сочетании с низким объемом, могут указывать на обструктивные проблемы (например, CBAVD).
2. Концентрация и общее количество сперматозоидов: количественный показатель
Количественная оценка производства сперматозоидов является основным предиктором потенциала фертильности.
А. Концентрация против общего количества сперматозоидов
- Концентрация сперматозоидов: Количество сперматозоидов на миллилитр. Нижний предел ВОЗ 6-го издания: 16 × 10⁶/мл.
- Общее количество сперматозоидов: Общее количество на весь эякулят (нижний предел ВОЗ 6-го издания: 39 × 10⁶).
- Клиническое значение: ASRM и ESHRE подчеркивают, что общее количество сперматозоидов является более надежным показателем здоровья яичек, чем одна концентрация, поскольку учитывает весь репродуктивный выход.
Б. Оборудование "золотого стандарта" (ISO 23162 против других)
- Улучшенная камера Нойбауэра для подсчета клеток: Как ВОЗ 6-е издание, так и ISO 23162 требуют этого как единственно приемлемой ручной счетной камеры.
- Отклонение камер с фиксированной глубиной: Важный момент расхождения. ISO 23162 строго запрещает использование камер с фиксированной глубиной (например, предметных стекол Makler или Leja) для окончательной оценки концентрации, поскольку их высокий коэффициент вариации (CV) не соответствует международным стандартам точности.
- Повторный подсчет: ISO 23162 требует двух отдельных повторений (подсчет не менее 200 сперматозоидов каждый). Если результаты двух подсчетов не совпадают в определенном статистическом диапазоне (распределение Пуассона), тест должен быть повторен.
3. Подвижность сперматозоидов: измерение прогрессивной компетентности
Подвижность является мерой "жизненной энергии". ВОЗ 6-е издание упростило классификацию для снижения высокой вариабельности между наблюдателями, обнаруженной в предыдущих изданиях.
А. Трехкатегориальная классификация
Предыдущая 4-балльная система (A, B, C, D) была заменена более объективной 3-категориальной системой:
- Прогрессивная подвижность (PR): Сперматозоиды, движущиеся активно, либо линейно, либо по большому кругу, независимо от скорости.
- Непрогрессивная подвижность (NP): Движение без прогрессии (например, плавание по маленьким кругам или только вибрация головки/хвоста).
- Неподвижность (IM): Полное отсутствие движения.
- Референсное значение: ВОЗ 6-е издание требует ≥30% прогрессивной (PR) или ≥42% общей подвижности (PR + NP).
Б. Термическое требование ("реалистичная" среда)
- Требование ISO 23162: Подвижность сперматозоидов сильно зависит от температуры. ISO 23162 требует проведения анализа при температуре 37°C.
- Клиническое обоснование: Анализ при комнатной температуре (20-22°C) вызывает замедление метаболизма сперматозоидов, что приводит к "ложно" низким показателям прогрессивной подвижности. Интегрированные термостадии (как те, что находятся в SQA-6100VET) необходимы для соответствия этому стандарту.
4. Морфология сперматозоидов: "строгие критерии"
Морфология обеспечивает наиболее глубокое понимание биологического "контроля качества" яичек.
А. Строгие критерии Крюгера (правило 4%)
Все стандарты сходятся на критериях Крюгера (Строгих). Сперматозоид считается "нормальным" только если он по существу идеален. Любой "пограничный" сперматозоид классифицируется как аномальный.
- Порог нормы: ≥4%.
- Анатомия головки/хвоста: Требуются конкретные размеры для длины головки (3,7–4,7 мкм) и размера акросомы (40–70% площади головки).
Б. Индекс тератозооспермии (TZI)
ВОЗ 6-е издание рекомендует рассчитывать TZI, который представляет собой среднее количество дефектов на аномальный сперматозоид. Высокий TZI является маркером значительной дисфункции сперматогенеза, даже если общий процент нормальных превышает 4%.
В. Клиническое применение (ЭКО против ИКСИ)
ASRM и ESHRE разъясняют, что наибольшая клиническая полезность морфологии заключается в выборе способа оплодотворения. Если морфология <4%, лаборатории часто переходят от стандартного ЭКО к ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида), чтобы обеспечить ручной отбор наиболее привлекательных сперматозоидов для оплодотворения.
5. Сводная таблица: сравнение стандартов ВОЗ 5-го и 6-го изданий
Эта таблица описывает ключевые "нижние референсные пределы" (5-й процентиль) для спермы человека.
| Параметр | ВОЗ 5-е изд. (2010) | ВОЗ 6-е изд. (2021) |
|---|---|---|
| Объем спермы (мл) | 1,5 | 1,4 |
| Общее количество сперматозоидов (10⁶/эякулят) | 39 | 39 |
| Концентрация сперматозоидов (10⁶/мл) | 15 | 16 |
| Общая подвижность (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Прогрессивная подвижность (PR, %) | 32 | 30 |
| Жизнеспособность (живые сперматозоиды, %) | 58 | 54 |
| Нормальная морфология (%) | 4 | 4 |
6. Гарантия качества лаборатории (центральный фокус ISO 23162)
Соответствие ISO 23162 требует больше, чем просто следование руководству ВОЗ; требуется документированное доказательство точности.
- Внутринаблюдательский CV: Техники должны доказать, что могут подсчитать один и тот же образец дважды и получить тот же результат в пределах 10% погрешности.
- Внешняя оценка качества (EQA): Лаборатории должны участвовать в глобальном тестировании квалификации (как программы ESHRE или CAP), чтобы сравнивать свои результаты с другими стандартизированными лабораториями.
- Стандартизированная отчетность: Отчеты должны четко указывать, какие стандарты соблюдались, и включать референсные диапазоны для каждого параметра, чтобы помочь клиницистам в интерпретации.
Заключение: Путь к точности
Модернизация анализа спермы человека определяется переходом от "интуиции техника" к объективным, автоматизированным и терморегулируемым методологиям. Соблюдая объединенные требования ВОЗ 6-го издания и ISO 23162, лаборатории обеспечивают высочайший уровень диагностической точности, предоставляя пациентам надежную дорожную карту для их пути к фертильности.
Ссылки и технические ресурсы
- Всемирная организация здравоохранения (2021). Руководство ВОЗ по исследованию и обработке спермы человека, 6-е изд.
- ISO 23162:2021. Базовое исследование спермы — Спецификация и методы испытаний.
- Группа специальных интересов ESHRE по андрологии. Рекомендации по лучшей практике анализа спермы.
- Комитет по практике Американского общества репродуктивной медицины (ASRM) (2021). Диагностическая оценка бесплодного мужчины: мнение комитета.