Standardele Globale pentru Analiza Spermei Umane: Un Ghid Comparativ (WHO a 6-a, ISO 23162, ESHRE și ASRM)
În 2021, peisajul andrologiei umane a fost redefinit prin lansarea dublă a Manualului Ediției a 6-a WHO și a standardului ISO 23162:2021. Aceste documente au mutat domeniul către standardizare riguroasă, subliniind că acuratețea este posibilă doar prin control strict al calității și reducerea subiectivității umane.
1. Faza Pre-analitică: Baza Calității
Standardizarea începe înainte ca proba să ajungă la microscop. Atât WHO a 6-a cât și ISO 23162 subliniază că variabilele pre-analitice sunt cauza cea mai comună a rezultatelor "false" de sub-fertilitate.
- Perioada de Abstinență: Standardizată la 2 până la 7 zile. ASRM notează că, deși abstinența mai lungă crește volumul și numărul, reduce semnificativ motilitatea și crește fragmentarea ADN (DFI).
- Colectare: Trebuie efectuată într-un recipient pre-validat pentru Testul de Supraviețuire a Spermatozoizilor Umani (HSSA).
- Evaluare Macroscopică: Volumul trebuie măsurat cu precizie înaltă. ISO 23162 recomandă măsurarea prin greutate (presupunând o densitate de 1.0 g/mL) pentru a evita pierderea de "lipire pe perete" asociată cu pipetele sau cilindrii gradați.
- pH: Limita inferioară rămâne 7.2. Valorile sub aceasta, combinate cu volum scăzut, pot indica probleme obstructive (de ex., CBAVD).
2. Concentrația Spermatozoizilor și Numărul Total: Metrica Cantitativă
Evaluarea cantitativă a producției de spermatozoizi este un predictor primar al potențialului de fertilitate.
A. Concentrație vs. Număr Total de Spermatozoizi
- Concentrația Spermatozoizilor: Numărul de spermatozoizi pe mililitru. Limita inferioară WHO a 6-a: 16 × 10⁶/mL.
- Număr Total de Spermatozoizi: Numărul total pe întregul ejaculat (limita inferioară WHO a 6-a: 39 × 10⁶).
- Valoare Clinică: ASRM și ESHRE subliniază că Numărul Total de Spermatozoizi este un indicator mai robust al sănătății testiculare decât concentrația singură, deoarece ține cont de întreaga producție reproductivă.
B. Echipamentul "Standard de Aur" (ISO 23162 vs. Altele)
- Hemocitometru Neubauer Îmbunătățit: Atât WHO a 6-a cât și ISO 23162 impun acest lucru ca singura cameră de numărare manuală acceptabilă.
- Respingerea Camerelor cu Adâncime Fixă: Un punct major de divergență. ISO 23162 interzice strict utilizarea camerelor cu adâncime fixă (de ex., lamele Makler sau Leja) pentru evaluarea definitivă a concentrației, deoarece Coeficientul lor de Variație (CV) ridicat nu îndeplinește standardele internaționale de precizie.
- Numărare Replicată: ISO 23162 necesită două replici separate (numărând cel puțin 200 de spermatozoizi fiecare). Dacă rezultatele celor două numărări nu se aliniază într-un interval statistic specific (distribuție Poisson), testul trebuie repetat.
3. Motilitatea Spermatozoizilor: Măsurarea Competenței Progresive
Motilitatea este măsura "energiei vitale". WHO a 6-a a simplificat clasificarea pentru a reduce variabilitatea ridicată între observatori găsită în edițiile anterioare.
A. Clasificarea în Trei Categorii
Sistemul anterior cu 4 grade (A, B, C, D) a fost înlocuit cu un sistem mai obiectiv cu 3 categorii:
- Motilitate Progresivă (PR): Spermatozoizi care se mișcă activ, fie liniar, fie într-un cerc mare, indiferent de viteză.
- Motilitate Neprogresivă (NP): Mișcare fără progresie (de ex., înot în cercuri mici, sau doar cap/coadă vibrând).
- Imotilitate (IM): Nicio mișcare deloc.
- Valoare de Referință: WHO a 6-a necesită ≥30% Progresivă (PR) sau ≥42% Motilitate Totală (PR + NP).
B. Cerința Termică (Mediul "Similar Vieții")
- Mandatul ISO 23162: Motilitatea spermatozoizilor este foarte dependentă de temperatură. ISO 23162 necesită ca analiza să fie efectuată la 37°C.
- Rațiunea Clinică: Analizarea la temperatura camerei (20-22°C) face ca metabolismul spermatozoizilor să încetinească, rezultând scoruri "false" scăzute de motilitate progresivă. Plățile termice integrate (precum cele găsite în SQA-6100VET) sunt esențiale pentru conformitatea cu acest standard.
4. Morfologia Spermatozoizilor: "Criteriile Stricte"
Morfologia oferă cea mai profundă perspectivă asupra "controlului calității" biologic al testiculelor.
A. Criteriile Stricte Kruger (Regula 4%)
Toate standardele converg către Criteriile Stricte Kruger. Un spermatozoid este "Normal" doar dacă este în esență perfect. Orice spermatozoid "la limită" este categorisit ca anormal.
- Pragul Normal: ≥4%.
- Anatomia Cap/Coadă: Dimensiuni specifice pentru lungimea capului (3.7–4.7 μm) și dimensiunea acrosomului (40–70% din zona capului) sunt necesare.
B. Indicele Teratozoospermiei (TZI)
WHO a 6-a recomandă calcularea TZI, care este numărul mediu de defecte pe spermatozoid anormal. Un TZI ridicat este un marker al disfuncției semnificative a spermatogenezei, chiar dacă procentul total normal este peste 4%.
C. Aplicația Clinică (FIV vs. ICSI)
ASRM și ESHRE clarifică că cea mai mare utilitate clinică a morfologiei este în selectarea modului de fertilizare. Dacă morfologia este <4%, laboratoarele trec adesea de la FIV standard la ICSI (Injectie Intracitoplasmatică de Spermatozoid) pentru a asigura că spermatozoizii cu cea mai bună aspect sunt selectați manual pentru fertilizare.
5. Tabel Rezumat: Compararea Standardelor WHO a 5-a și WHO a 6-a
Acest tabel prezintă limitele cheie de referință inferioare (percentila a 5-a) pentru spermă umană.
| Parametru | WHO a 5-a Ed (2010) | WHO a 6-a Ed (2021) |
|---|---|---|
| Volum Spermă (mL) | 1.5 | 1.4 |
| Număr Total Spermatozoizi (10⁶/ejaculat) | 39 | 39 |
| Concentrație Spermatozoizi (10⁶/mL) | 15 | 16 |
| Motilitate Totală (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Motilitate Progresivă (PR, %) | 32 | 30 |
| Vitalitate (Spermatozoizi Vii, %) | 58 | 54 |
| Morfologie Normală (%) | 4 | 4 |
6. Asigurarea Calității în Laborator (Focus Central ISO 23162)
Conformitatea cu ISO 23162 necesită mai mult decât urmărirea manualului WHO; necesită dovezi documentate de precizie.
- CV Intra-observator: Tehnicienii trebuie să dovedească că pot număra aceeași probă de două ori și să obțină același rezultat într-o marjă de eroare de 10%.
- Evaluare Calitate Externă (EQA): Laboratoarele trebuie să participe la testări de competență globale (precum programele ESHRE sau CAP) pentru a-și compara rezultatele cu alte laboratoare standardizate.
- Raportare Standardizată: Rapoartele ar trebui să indice clar ce standarde au fost urmate și să includă intervalele de referință pentru fiecare parametru pentru a ajuta interpretarea clinicienilor.
Concluzie: Calea către Precizie
Modernizarea analizei spermei umane este definită de o schimbare de la "intuiția tehnicianului" către metodologii obiective, automatizate și controlate termic. Prin respectarea cerințelor combinate ale WHO a 6-a și ISO 23162, laboratoarele asigură cel mai înalt nivel de acuratețe diagnostică, oferind pacienților o hartă rutieră de încredere pentru călătoria lor de fertilitate.
Referințe și Resurse Tehnice
- Organizația Mondială a Sănătății (2021). Manualul de laborator WHO pentru examinarea și procesarea spermei umane, ed. a 6-a.
- ISO 23162:2021. Examinare de bază a spermei — Specificație și metode de testare.
- Grupul de Interes Special ESHRE în Andrologie. Ghiduri pentru cele mai bune practici în analiza spermei.
- Comitetul de Practică al Societății Americane de Medicină Reproductivă (ASRM) (2021). Evaluarea diagnostică a bărbatului infertile: o opinie de comitet.