Globalne Standardy Analizy Nasienia Ludzkiego: Przewodnik Porównawczy (WHO 6. wydanie, ISO 23162, ESHRE i ASRM)
W 2021 roku krajobraz andrologii ludzkiej został zredefiniowany przez podwójne wydanie Podręcznika 6. Wydania WHO i standardu ISO 23162:2021. Te dokumenty przeniosły dziedzinę w kierunku rygorystycznej standaryzacji, podkreślając, że dokładność jest możliwa tylko poprzez ścisłą kontrolę jakości i redukcję subiektywności ludzkiej.
1. Faza Przedanalityczna: Podstawa Jakości
Standaryzacja rozpoczyna się, zanim próbka dotrze do mikroskopu. Zarówno WHO 6. wydanie, jak i ISO 23162 podkreślają, że zmienne przedanalityczne są najczęstszą przyczyną "fałszywych" wyników subpłodności.
- Okres Abstynencji: Standaryzowany na 2 do 7 dni. ASRM zauważa, że choć dłuższa abstynencja zwiększa objętość i liczbę, znacząco zmniejsza ruchliwość i zwiększa fragmentację DNA (DFI).
- Pobieranie: Musi być wykonane do pojemnika wcześniej zwalidowanego dla Testu Przeżywalności Plemników Ludzkich (HSSA).
- Ocena Makroskopowa: Objętość musi być mierzona z wysoką precyzją. ISO 23162 zaleca pomiar wagowy (zakładając gęstość 1,0 g/mL), aby uniknąć straty związanej z "przyklejaniem się do ścian" przy użyciu pipet lub cylindrów miarowych.
- pH: Dolna granica pozostaje 7,2. Wartości poniżej tego, w połączeniu z niską objętością, mogą wskazywać na problemy obturacyjne (np. CBAVD).
2. Stężenie Plemników i Całkowita Liczba: Metryka Ilościowa
Ilościowa ocena produkcji plemników jest głównym predyktorem potencjału płodności.
A. Stężenie vs. Całkowita Liczba Plemników
- Stężenie Plemników: Liczba plemników na mililitr. Dolna granica WHO 6. wydanie: 16 × 10⁶/mL.
- Całkowita Liczba Plemników: Całkowita liczba na cały ejakulat (dolna granica WHO 6. wydanie: 39 × 10⁶).
- Wartość Kliniczna: ASRM i ESHRE podkreślają, że Całkowita Liczba Plemników jest bardziej niezawodnym wskaźnikiem zdrowia jąder niż samo stężenie, ponieważ uwzględnia całą produkcję reprodukcyjną.
B. Sprzęt "Złotego Standardu" (ISO 23162 vs. Inne)
- Ulepszony Hemocytometr Neubauera: Zarówno WHO 6. wydanie, jak i ISO 23162 nakazują to jako jedyną akceptowalną ręczną komorę zliczającą.
- Odrzucenie Komór o Stałej Głębokości: Główny punkt rozbieżności. ISO 23162 surowo zabrania używania komór o stałej głębokości (np. szkiełka Maklera lub Leja) do ostatecznej oceny stężenia, ponieważ ich wysoki Współczynnik Zmienności (CV) nie spełnia międzynarodowych standardów precyzji.
- Powtórne Zliczanie: ISO 23162 wymaga dwóch oddzielnych powtórzeń (zliczanie co najmniej 200 plemników każdy). Jeśli wyniki dwóch zliczeń nie są zgodne w określonym zakresie statystycznym (rozkład Poissona), test musi być powtórzony.
3. Ruchliwość Plemników: Pomiar Kompetencji Postępowej
Ruchliwość jest miarą "energii życiowej". WHO 6. wydanie uprościło klasyfikację, aby zmniejszyć wysoką zmienność między obserwatorami znalezioną w poprzednich wydaniach.
A. Klasyfikacja Trójkategorialna
Poprzedni system 4-stopniowy (A, B, C, D) został zastąpiony bardziej obiektywnym systemem 3-kategorialnym:
- Ruchliwość Postępowa (PR): Plemniki poruszające się aktywnie, liniowo lub w dużym kole, niezależnie od prędkości.
- Ruchliwość Niepostępowa (NP): Ruch bez postępu (np. pływanie w małych kółkach lub tylko wibracje głowy/ogona).
- Nieruchliwość (IM): Brak jakiegokolwiek ruchu.
- Wartość Referencyjna: WHO 6. wydanie wymaga ≥30% Postępowej (PR) lub ≥42% Całkowitej Ruchliwości (PR + NP).
B. Wymaganie Termiczne (Środowisko "Zbliżone do Życia")
- Mandat ISO 23162: Ruchliwość plemników jest wysoce zależna od temperatury. ISO 23162 wymaga, aby analiza była wykonywana w temperaturze 37°C.
- Uzasadnienie Kliniczne: Analiza w temperaturze pokojowej (20-22°C) powoduje spowolnienie metabolizmu plemników, co skutkuje "fałszywie" niskimi wynikami ruchliwości postępowej. Zintegrowane stoliki grzewcze (jak te w SQA-6100VET) są niezbędne do zgodności z tym standardem.
4. Morfologia Plemników: "Ścisłe Kryteria"
Morfologia zapewnia najgłębszy wgląd w biologiczną "kontrolę jakości" jąder.
A. Ścisłe Kryteria Krugera (Reguła 4%)
Wszystkie standardy zbiegają się w Ścisłych Kryteriach Krugera. Plemnik jest "Normalny" tylko wtedy, gdy jest zasadniczo doskonały. Każdy "graniczny" plemnik jest kategoryzowany jako nieprawidłowy.
- Próg Normalności: ≥4%.
- Anatomia Głowy/Ogona: Wymagane są określone wymiary długości głowy (3,7–4,7 μm) i rozmiaru akrosomu (40–70% powierzchni głowy).
B. Indeks Teratozoospermii (TZI)
WHO 6. wydanie zaleca obliczanie TZI, który jest średnią liczbą defektów na nieprawidłowy plemnik. Wysoki TZI jest markerem znacznej dysfunkcji spermatogenezy, nawet jeśli całkowity procent normalnych jest powyżej 4%.
C. Zastosowanie Kliniczne (IVF vs. ICSI)
ASRM i ESHRE wyjaśniają, że największa użyteczność kliniczna morfologii polega na wyborze metody zapłodnienia. Jeśli morfologia jest <4%, laboratoria często przechodzą ze standardowego IVF do ICSI (Dooplazmatyczna Iniekcja Plemników), aby zapewnić ręczny wybór najlepiej wyglądających plemników do zapłodnienia.
5. Tabela Podsumowująca: Porównanie Standardów WHO 5. i 6. Wydania
Ta tabela przedstawia kluczowe "Dolne Granice Referencyjne" (5. percentyl) dla nasienia ludzkiego.
| Parametr | WHO 5. wyd. (2010) | WHO 6. wyd. (2021) |
|---|---|---|
| Objętość Nasienia (mL) | 1,5 | 1,4 |
| Całkowita Liczba Plemników (10⁶/ejakulat) | 39 | 39 |
| Stężenie Plemników (10⁶/mL) | 15 | 16 |
| Całkowita Ruchliwość (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Ruchliwość Postępowa (PR, %) | 32 | 30 |
| Żywotność (Żywe Plemniki, %) | 58 | 54 |
| Normalna Morfologia (%) | 4 | 4 |
6. Zapewnienie Jakości Laboratorium (Centralny Fokus ISO 23162)
Zgodność z ISO 23162 wymaga więcej niż tylko przestrzegania podręcznika WHO; wymaga udokumentowanego dowodu precyzji.
- CV Wewnątrzobserwatorowy: Technicy muszą udowodnić, że mogą policzyć tę samą próbkę dwukrotnie i uzyskać ten sam wynik w granicach błędu 10%.
- Zewnętrzna Ocena Jakości (EQA): Laboratoria muszą uczestniczyć w globalnych testach biegłości (takich jak programy ESHRE lub CAP), aby porównać swoje wyniki z innymi standaryzowanymi laboratoriami.
- Standaryzowane Raportowanie: Raporty powinny jasno stwierdzać, które standardy były przestrzegane i zawierać zakresy referencyjne dla każdego parametru, aby pomóc w interpretacji klinicznej.
Wnioski: Droga do Precyzji
Modernizacja analizy nasienia ludzkiego jest definiowana przez przejście od "intuicji technika" w kierunku obiektywnych, zautomatyzowanych i kontrolowanych termicznie metodologii. Poprzez przestrzeganie połączonych wymagań WHO 6. wydania i ISO 23162, laboratoria zapewniają najwyższy poziom dokładności diagnostycznej, dostarczając pacjentom niezawodną mapę drogową dla ich podróży płodnościowej.
Źródła i Zasoby Techniczne
- World Health Organization (2021). WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen, 6th ed.
- ISO 23162:2021. Basic semen examination — Specification and test methods.
- ESHRE Special Interest Group in Andrology. Semen analysis best practice guidelines.
- Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine (ASRM) (2021). Diagnostic evaluation of the infertile male: a committee opinion.