Standard Globali per l'Analisi dello Sperma Umano: Guida Comparativa (OMS 6a, ISO 23162, ESHRE, & ASRM)
Nel 2021, il panorama dell'andrologia umana è stato ridefinito dal doppio rilascio del Manuale della 6a Edizione OMS e dello standard ISO 23162:2021. Questi documenti hanno spostato il campo verso una standardizzazione rigorosa, sottolineando che l'accuratezza è possibile solo attraverso un rigoroso controllo di qualità e la riduzione della soggettività umana.
1. Fase Pre-analitica: La Base della Qualità
La standardizzazione inizia prima che il campione raggiunga il microscopio. Sia l'OMS 6a che l'ISO 23162 sottolineano che le variabili pre-analitiche sono la causa più comune di risultati "falsi" di sub-fertilità.
- Periodo di Astinenza: Standardizzato a 2-7 giorni. L'ASRM nota che mentre un'astinenza più lunga aumenta volume e conteggio, riduce significativamente la motilità e aumenta la frammentazione del DNA (DFI).
- Raccolta: Deve essere eseguita in un contenitore pre-validato per il Saggio di Sopravvivenza degli Spermatozoi Umani (HSSA).
- Valutazione Macroscopica: Il volume deve essere misurato con alta precisione. L'ISO 23162 raccomanda la misurazione per peso (assumendo una densità di 1,0 g/mL) per evitare la perdita di "aderenza alle pareti" associata a pipette o cilindri graduati.
- pH: Il limite inferiore rimane 7,2. Valori inferiori a questo, combinati con volume basso, possono indicare problemi ostruttivi (ad es. CBAVD).
2. Concentrazione e Conteggio Totale degli Spermatozoi: La Metrica Quantitativa
La valutazione quantitativa della produzione di spermatozoi è un predittore primario del potenziale di fertilità.
A. Concentrazione vs. Numero Totale di Spermatozoi
- Concentrazione degli Spermatozoi: Il numero di spermatozoi per millilitro. Limite inferiore OMS 6a: 16 × 10⁶/mL.
- Numero Totale di Spermatozoi: Il conteggio totale per l'intero eiaculato (limite inferiore OMS 6a: 39 × 10⁶).
- Valore Clinico: ASRM ed ESHRE sottolineano che il Numero Totale di Spermatozoi è un indicatore più robusto della salute testicolare rispetto alla sola concentrazione, poiché tiene conto dell'intera produzione riproduttiva.
B. L'Attrezzatura "Gold Standard" (ISO 23162 vs. Altri)
- Emocitometro di Neubauer Migliorato: Sia l'OMS 6a che l'ISO 23162 lo prescrivono come unica camera di conteggio manuale accettabile.
- Rifiuto delle Camere a Profondità Fissa: Un punto importante di divergenza. L'ISO 23162 vieta rigorosamente l'uso di camere a profondità fissa (ad es. vetrini Makler o Leja) per la valutazione definitiva della concentrazione perché il loro alto Coefficiente di Variazione (CV) non soddisfa gli standard internazionali di precisione.
- Conteggio Replicato: L'ISO 23162 richiede due repliche separate (contando almeno 200 spermatozoi ciascuna). Se i risultati dei due conteggi non si allineano entro un intervallo statistico specifico (distribuzione di Poisson), il test deve essere ripetuto.
3. Motilità degli Spermatozoi: Misurare la Competenza Progressiva
La motilità è la misura dell'"energia vitale". L'OMS 6a ha semplificato la classificazione per ridurre l'elevata variabilità inter-osservatore riscontrata nelle edizioni precedenti.
A. La Classificazione a Tre Categorie
Il precedente sistema a 4 gradi (A, B, C, D) è stato sostituito da un sistema a 3 categorie più oggettivo:
- Motilità Progressiva (PR): Spermatozoi che si muovono attivamente, linearmente o in un grande cerchio, indipendentemente dalla velocità.
- Motilità Non Progressiva (NP): Movimento senza progressione (ad es. nuotare in piccoli cerchi, o solo testa/coda che vibra).
- Immobilità (IM): Nessun movimento.
- Valore di Riferimento: L'OMS 6a richiede ≥30% Progressiva (PR) o ≥42% Motilità Totale (PR + NP).
B. Il Requisito Termico (L'Ambiente "Simile alla Vita")
- Mandato ISO 23162: La motilità degli spermatozoi è altamente dipendente dalla temperatura. L'ISO 23162 richiede che l'analisi sia eseguita a 37°C.
- Razionale Clinico: Analizzare a temperatura ambiente (20-22°C) causa il rallentamento del metabolismo degli spermatozoi, risultando in punteggi "falsamente" bassi di motilità progressiva. Le piastre termiche integrate (come quelle presenti nello SQA-6100VET) sono essenziali per la conformità a questo standard.
4. Morfologia degli Spermatozoi: I "Criteri Severi"
La morfologia fornisce la più profonda intuizione sul "controllo di qualità" biologico dei testicoli.
A. Criteri Severi di Kruger (La Regola del 4%)
Tutti gli standard convergono sui Criteri di Kruger (Severi). Uno spermatozoo è "Normale" solo se è essenzialmente perfetto. Qualsiasi spermatozoo "borderline" è categorizzato come anormale.
- Soglia Normale: ≥4%.
- Anatomia Testa/Coda: Sono richieste dimensioni specifiche per la lunghezza della testa (3,7–4,7 μm) e la dimensione dell'acrosoma (40–70% dell'area della testa).
B. L'Indice di Teratozoospermia (TZI)
L'OMS 6a raccomanda di calcolare il TZI, che è il numero medio di difetti per spermatozoo anormale. Un TZI alto è un marker di significativa disfunzione della spermatogenesi, anche se la percentuale normale totale è superiore al 4%.
C. Applicazione Clinica (IVF vs. ICSI)
ASRM ed ESHRE chiariscono che la massima utilità clinica della morfologia è nella selezione della modalità di fecondazione. Se la morfologia è <4%, i laboratori spesso passano dalla FIV standard all'ICSI (Iniezione Intracitoplasmatica di Spermatozoi) per garantire che gli spermatozoi migliori vengano selezionati manualmente per la fecondazione.
5. Tabella Riassuntiva: Confronto tra Standard OMS 5a e OMS 6a
Questa tabella delinea i principali "Limiti di Riferimento Inferiori" (5° percentile) per lo sperma umano.
| Parametro | OMS 5a Ed (2010) | OMS 6a Ed (2021) |
|---|---|---|
| Volume dello Sperma (mL) | 1,5 | 1,4 |
| Numero Totale di Spermatozoi (10⁶/eiaculato) | 39 | 39 |
| Concentrazione degli Spermatozoi (10⁶/mL) | 15 | 16 |
| Motilità Totale (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Motilità Progressiva (PR, %) | 32 | 30 |
| Vitalità (Spermatozoi Vivi, %) | 58 | 54 |
| Morfologia Normale (%) | 4 | 4 |
6. Garanzia di Qualità del Laboratorio (Focus Centrale ISO 23162)
La conformità all'ISO 23162 richiede più del semplice seguire il manuale OMS; richiede una prova documentata di precisione.
- CV Intra-osservatore: I tecnici devono dimostrare di poter contare lo stesso campione due volte e ottenere lo stesso risultato entro un margine di errore del 10%.
- Valutazione di Qualità Esterna (EQA): I laboratori devono partecipare a test di competenza globali (come programmi ESHRE o CAP) per confrontare i loro risultati con altri laboratori standardizzati.
- Reportistica Standardizzata: I report dovrebbero chiaramente indicare quali standard sono stati seguiti e includere gli intervalli di riferimento per ciascun parametro per aiutare l'interpretazione del clinico.
Conclusione: Il Percorso Verso la Precisione
La modernizzazione dell'analisi dello sperma umano è definita da un passaggio dall'"intuizione del tecnico" verso metodologie oggettive, automatizzate e a temperatura controllata. Aderendo ai requisiti combinati dell'OMS 6a e dell'ISO 23162, i laboratori garantiscono il massimo livello di accuratezza diagnostica, fornendo ai pazienti una roadmap affidabile per il loro percorso di fertilità.
Riferimenti e Risorse Tecniche
- Organizzazione Mondiale della Sanità (2021). Manuale di laboratorio OMS per l'esame e l'elaborazione dello sperma umano, 6a ed.
- ISO 23162:2021. Esame base dello sperma — Specifica e metodi di test.
- Gruppo di Interesse Speciale ESHRE in Andrologia. Linee guida sulle migliori pratiche per l'analisi dello sperma.
- Comitato Pratico dell'American Society for Reproductive Medicine (ASRM) (2021). Valutazione diagnostica del maschio infertile: opinione del comitato.