Standar Global untuk Analisis Semen Manusia: Panduan Perbandingan (WHO Edisi ke-6, ISO 23162, ESHRE, & ASRM)
Pada tahun 2021, lanskap andrologi manusia didefinisikan ulang oleh rilis ganda Manual WHO Edisi ke-6 dan standar ISO 23162:2021. Dokumen-dokumen ini telah menggerakkan bidang menuju standardisasi yang ketat, menekankan bahwa akurasi hanya mungkin dicapai melalui kontrol kualitas yang ketat dan pengurangan subjektivitas manusia.
1. Fase Pre-analitik: Dasar Kualitas
Standardisasi dimulai sebelum sampel mencapai mikroskop. Baik WHO Edisi ke-6 maupun ISO 23162 menekankan bahwa variabel pre-analitik adalah penyebab paling umum dari hasil sub-fertilitas "palsu".
- Periode Pantang: Distandardisasi pada 2 hingga 7 hari. ASRM mencatat bahwa meskipun pantang yang lebih lama meningkatkan volume dan jumlah, hal itu secara signifikan mengurangi motilitas dan meningkatkan fragmentasi DNA (DFI).
- Pengumpulan: Harus dilakukan ke dalam wadah yang telah divalidasi sebelumnya untuk Human Sperm Survival Assay (HSSA).
- Penilaian Makroskopis: Volume harus diukur dengan presisi tinggi. ISO 23162 merekomendasikan pengukuran berdasarkan berat (dengan asumsi kepadatan 1.0 g/mL) untuk menghindari kehilangan "wall-sticking" yang terkait dengan pipet atau silinder bertingkat.
- pH: Batas bawah tetap 7.2. Nilai di bawah ini, dikombinasikan dengan volume rendah, dapat menunjukkan masalah obstruktif (misalnya, CBAVD).
2. Konsentrasi Sperma dan Jumlah Total: Metrik Kuantitatif
Penilaian kuantitatif produksi sperma adalah prediktor utama potensi kesuburan.
A. Konsentrasi vs. Jumlah Sperma Total
- Konsentrasi Sperma: Jumlah sperma per mililiter. Batas bawah WHO Edisi ke-6: 16 × 10⁶/mL.
- Jumlah Sperma Total: Jumlah total per seluruh ejakulat (batas bawah WHO Edisi ke-6: 39 × 10⁶).
- Nilai Klinis: ASRM dan ESHRE menekankan bahwa Jumlah Sperma Total adalah indikator kesehatan testis yang lebih kuat daripada konsentrasi saja, karena memperhitungkan seluruh output reproduksi.
B. Peralatan "Gold Standard" (ISO 23162 vs. Lainnya)
- Improved Neubauer Hemocytometer: Baik WHO Edisi ke-6 maupun ISO 23162 mewajibkan ini sebagai ruang hitung manual yang dapat diterima.
- Penolakan Ruang Kedalaman Tetap: Titik divergensi utama. ISO 23162 secara ketat melarang penggunaan ruang kedalaman tetap (misalnya, slide Makler atau Leja) untuk penilaian konsentrasi definitif karena Koefisien Variasi (CV) yang tinggi tidak memenuhi standar presisi internasional.
- Hitung Replikat: ISO 23162 memerlukan dua replikat terpisah (menghitung setidaknya 200 sperma masing-masing). Jika hasil dari dua hitungan tidak selaras dalam rentang statistik tertentu (distribusi Poisson), tes harus diulang.
3. Motilitas Sperma: Mengukur Kompetensi Progresif
Motilitas adalah ukuran "energi vital." WHO Edisi ke-6 menyederhanakan klasifikasi untuk mengurangi variabilitas antar-pengamat yang tinggi yang ditemukan dalam edisi sebelumnya.
A. Klasifikasi Tiga Kategori
Sistem 4-grade sebelumnya (A, B, C, D) telah diganti dengan sistem 3-kategori yang lebih objektif:
- Motilitas Progresif (PR): Sperma bergerak aktif, baik secara linear atau dalam lingkaran besar, terlepas dari kecepatan.
- Motilitas Non-progresif (NP): Gerakan tanpa progresi (misalnya, berenang dalam lingkaran kecil, atau hanya kepala/ekor bergetar).
- Non-motilitas (IM): Tidak ada gerakan sama sekali.
- Nilai Referensi: WHO Edisi ke-6 memerlukan ≥30% Progresif (PR) atau ≥42% Motilitas Total (PR + NP).
B. Persyaratan Termal (Lingkungan "Seperti Kehidupan")
- Mandat ISO 23162: Motilitas sperma sangat bergantung pada suhu. ISO 23162 memerlukan analisis dilakukan pada 37°C.
- Rasional Klinis: Menganalisis pada suhu kamar (20-22°C) menyebabkan metabolisme sperma melambat, menghasilkan skor motilitas progresif yang "palsu" rendah. Panggung pemanas terintegrasi (seperti yang ditemukan di SQA-6100VET) sangat penting untuk kepatuhan dengan standar ini.
4. Morfologi Sperma: "Kriteria Ketat"
Morfologi memberikan wawasan terdalam ke dalam "kontrol kualitas" biologis testis.
A. Kriteria Ketat Kruger (Aturan 4%)
Semua standar bertemu pada Kriteria Ketat Kruger. Sperma hanya "Normal" jika pada dasarnya sempurna. Sperma "borderline" apa pun dikategorikan sebagai abnormal.
- Ambang Normal: ≥4%.
- Anatomi Kepala/Ekor: Dimensi spesifik untuk panjang kepala (3.7–4.7 μm) dan ukuran akrosom (40–70% dari area kepala) diperlukan.
B. Indeks Teratozoospermia (TZI)
WHO Edisi ke-6 merekomendasikan perhitungan TZI, yang merupakan jumlah rata-rata cacat per sperma abnormal. TZI yang tinggi adalah penanda disfungsi spermatogenesis yang signifikan, bahkan jika persentase normal total di atas 4%.
C. Aplikasi Klinis (IVF vs. ICSI)
ASRM dan ESHRE menjelaskan bahwa utilitas klinis terbesar morfologi adalah dalam memilih mode fertilisasi. Jika morfologi <4%, laboratorium sering beralih dari IVF standar ke ICSI (Intracytoplasmic Sperm Injection) untuk memastikan sperma yang terlihat terbaik dipilih secara manual untuk fertilisasi.
5. Tabel Ringkasan: Membandingkan Standar WHO Edisi ke-5 dan ke-6
Tabel ini menguraikan "Batas Referensi Bawah" utama (persentil ke-5) untuk semen manusia.
| Parameter | WHO Edisi ke-5 (2010) | WHO Edisi ke-6 (2021) |
|---|---|---|
| Volume Semen (mL) | 1.5 | 1.4 |
| Jumlah Sperma Total (10⁶/ejakulat) | 39 | 39 |
| Konsentrasi Sperma (10⁶/mL) | 15 | 16 |
| Motilitas Total (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Motilitas Progresif (PR, %) | 32 | 30 |
| Vitalitas (Sperma Hidup, %) | 58 | 54 |
| Morfologi Normal (%) | 4 | 4 |
6. Jaminan Kualitas Laboratorium (Fokus Utama ISO 23162)
Kepatuhan dengan ISO 23162 memerlukan lebih dari sekadar mengikuti manual WHO; ini memerlukan bukti dokumentasi presisi.
- CV Intra-pengamat: Teknisi harus membuktikan bahwa mereka dapat menghitung sampel yang sama dua kali dan mendapatkan hasil yang sama dalam margin kesalahan 10%.
- Penilaian Kualitas Eksternal (EQA): Laboratorium harus berpartisipasi dalam pengujian kecakapan global (seperti program ESHRE atau CAP) untuk membandingkan hasil mereka dengan laboratorium terstandarisasi lainnya.
- Pelaporan Terstandarisasi: Laporan harus dengan jelas menyatakan standar mana yang diikuti dan menyertakan rentang referensi untuk setiap parameter untuk membantu interpretasi klinisi.
Kesimpulan: Jalan Menuju Presisi
Modernisasi analisis semen manusia didefinisikan oleh pergeseran dari "intuisi teknisi" menuju metodologi yang objektif, otomatis, dan terkontrol suhu. Dengan mematuhi persyaratan gabungan WHO Edisi ke-6 dan ISO 23162, laboratorium memastikan tingkat akurasi diagnostik tertinggi, memberikan pasien dengan peta jalan yang dapat diandalkan untuk perjalanan kesuburan mereka.
Referensi & Sumber Daya Teknis
- World Health Organization (2021). WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen, 6th ed.
- ISO 23162:2021. Basic semen examination — Specification and test methods.
- ESHRE Special Interest Group in Andrology. Semen analysis best practice guidelines.
- Practice Committee of the American Society for Reproductive Medicine (ASRM) (2021). Diagnostic evaluation of the infertile male: a committee opinion.