Глобални стандарти за анализ на човешка сперма: Сравнително ръководство (6-то издание на СЗО, ISO 23162, ESHRE и ASRM)
През 2021 г. ландшафтът на човешката андрология беше преопределен от двойното издаване на Ръководството на СЗО 6-то издание и стандарта ISO 23162:2021. Тези документи преместиха полето към строга стандартизация, подчертавайки, че точността е възможна само чрез строг контрол на качеството и намаляване на човешката субективност.
1. Предианалитична фаза: Базовата линия на качеството
Стандартизацията започва преди пробата да достигне микроскопа. И 6-то издание на СЗО, и ISO 23162 подчертават, че предианалитичните променливи са най-честата причина за "фалшиви" резултати за понижена плодовитост.
- Период на въздържание: Стандартизиран на 2 до 7 дни. ASRM отбелязва, че докато по-дългото въздържание увеличава обема и броя, то значително намалява подвижността и увеличава фрагментацията на ДНК (DFI).
- Събиране: Трябва да се извърши в контейнер, предварително валидиран за теста за оцеляване на човешка сперма (HSSA).
- Макроскопска оценка: Обемът трябва да се измерва с висока прецизност. ISO 23162 препоръчва измерване по тегло (приемайки плътност от 1.0 g/mL), за да се избегне загубата от "залепване на стената", свързана с пипети или градуирани цилиндри.
- pH: Долната граница остава 7.2. Стойности под това, комбинирани с нисък обем, могат да покажат обструктивни проблеми (напр. CBAVD).
2. Концентрация на сперматозоиди и общ брой: Количественият показател
Количествената оценка на производството на сперматозоиди е основен предсказател на потенциала за плодовитост.
А. Концентрация срещу общ брой сперматозоиди
- Концентрация на сперматозоиди: Броят сперматозоиди на милилитър. Долна граница на СЗО 6-то издание: 16 × 10⁶/mL.
- Общ брой сперматозоиди: Общият брой на цялата еякулация (долна граница на СЗО 6-то издание: 39 × 10⁶).
- Клинична стойност: ASRM и ESHRE подчертават, че общият брой сперматозоиди е по-надежден показател за здравето на тестисите от самата концентрация, тъй като отчита целия репродуктивен изход.
Б. Оборудването "Златен стандарт" (ISO 23162 срещу други)
- Подобрен хемоцитометър на Neubauer: И 6-то издание на СЗО, и ISO 23162 задължават това като единствената приемлива ръчна броячна камера.
- Отхвърляне на камери с фиксирана дълбочина: Основна точка на разминаване. ISO 23162 строго забранява използването на камери с фиксирана дълбочина (напр. слайдове Makler или Leja) за окончателна оценка на концентрацията, тъй като техният висок коефициент на вариация (CV) не отговаря на международните стандарти за прецизност.
- Повторно броене: ISO 23162 изисква две отделни повторения (броене на поне 200 сперматозоиди всяко). Ако резултатите от двете броения не се съобразят в определен статистически диапазон (разпределение на Поасон), тестът трябва да се повтори.
3. Подвижност на сперматозоидите: Измерване на прогресивната компетентност
Подвижността е мярка за "жизнена енергия". 6-то издание на СЗО опрости класификацията, за да намали високата вариабилност между наблюдателите, намерена в предишните издания.
А. Трикатегорийната класификация
Предишната 4-степенна система (A, B, C, D) е заменена с по-обективна 3-категорийна система:
- Прогресивна подвижност (PR): Сперматозоиди, движещи се активно, или линейно, или в голям кръг, независимо от скоростта.
- Непрогресивна подвижност (NP): Движение без прогресия (напр. плуване в малки кръгове или само вибриране на глава/опашка).
- Неподвижност (IM): Няма движение изобщо.
- Референтна стойност: 6-то издание на СЗО изисква ≥30% Прогресивна (PR) или ≥42% Обща подвижност (PR + NP).
Б. Термалното изискване (Околната среда "подобна на живота")
- Изискване на ISO 23162: Подвижността на сперматозоидите е силно зависима от температурата. ISO 23162 изисква анализа да се извършва при 37°C.
- Клинична обосновка: Анализирането при стайна температура (20-22°C) причинява забавяне на метаболизма на сперматозоидите, водещо до "фалшиво" ниски резултати за прогресивна подвижност. Интегрираните термални платформи (като тези в SQA-6100VET) са от съществено значение за съответствие с този стандарт.
4. Морфология на сперматозоидите: "Строгите критерии"
Морфологията предоставя най-дълбокото прозрение в биологичния "контрол на качеството" на тестисите.
А. Строги критерии на Kruger (Правилото 4%)
Всички стандарти се сближават около критериите на Kruger (Строги). Един сперматозоид е "Нормален" само ако е по същество перфектен. Всеки "граничен" сперматозоид се категоризира като анормален.
- Нормален праг: ≥4%.
- Анатомия на глава/опашка: Изискват се специфични размери за дължина на главата (3.7–4.7 μm) и размер на акрозомата (40–70% от площта на главата).
Б. Индексът на тератозооспермия (TZI)
6-то издание на СЗО препоръчва изчисляване на TZI, който е средният брой дефекти на анормален сперматозоид. Висок TZI е маркер на значителна дисфункция на сперматогенезата, дори ако общият нормален процент е над 4%.
В. Клинично приложение (IVF срещу ICSI)
ASRM и ESHRE изясняват, че най-голямата клинична полезност на морфологията е при избора на режим на оплождане. Ако морфологията е <4%, лабораториите често преминават от стандартен IVF към ICSI (Интрацитоплазмена инжекция на сперматозоид), за да се гарантира, че най-добре изглеждащите сперматозоиди се избират ръчно за оплождане.
5. Обобщена таблица: Сравнение на стандартите на СЗО 5-то и 6-то издание
Тази таблица очертава ключовите "Долни референтни граници" (5-ти перцентил) за човешка сперма.
| Параметър | СЗО 5-то изд. (2010) | СЗО 6-то изд. (2021) |
|---|---|---|
| Обем на сперма (mL) | 1.5 | 1.4 |
| Общ брой сперматозоиди (10⁶/еякулация) | 39 | 39 |
| Концентрация на сперматозоиди (10⁶/mL) | 15 | 16 |
| Обща подвижност (PR + NP, %) | 40 | 42 |
| Прогресивна подвижност (PR, %) | 32 | 30 |
| Жизненост (Живи сперматозоиди, %) | 58 | 54 |
| Нормална морфология (%) | 4 | 4 |
6. Осигуряване на качеството в лабораторията (Централен фокус на ISO 23162)
Съответствието с ISO 23162 изисква повече от просто следване на ръководството на СЗО; то изисква документирано доказателство за прецизност.
- CV между наблюдатели: Техниците трябва да докажат, че могат да преброят една и съща проба два пъти и да получат същия резултат в рамките на 10% граница на грешка.
- Външна оценка на качеството (EQA): Лабораториите трябва да участват в глобални тестове за компетентност (като програми на ESHRE или CAP), за да сравнят резултатите си с други стандартизирани лаборатории.
- Стандартизирано отчитане: Отчетите трябва ясно да посочат кои стандарти са следвани и да включват референтните диапазони за всеки параметър, за да подпомогнат интерпретацията на клинициста.
Заключение: Пътят към прецизност
Модернизацията на анализа на човешка сперма се определя от преминаването от "интуицията на техника" към обективни, автоматизирани и температурно контролирани методологии. Чрез спазване на комбинираните изисквания на 6-то издание на СЗО и ISO 23162, лабораториите осигуряват най-високо ниво на диагностична точност, предоставяйки на пациентите надеждна пътна карта за тяхното пътешествие към плодовитост.
Референции и технически ресурси
- Световна здравна организация (2021). Ръководство на СЗО за изследване и обработка на човешка сперма, 6-то издание.
- ISO 23162:2021. Основно изследване на сперма — Спецификация и методи за тестване.
- ESHRE Специална интересна група по андрология. Най-добри практики за анализ на сперма.
- Комитет по практика на Американското общество за репродуктивна медицина (ASRM) (2021). Диагностична оценка на безплодния мъж: становище на комитета.